bakimliyiz
Sponsor Reklamlar
Geri git   Bakimliyiz.Com > GENEL KÜLTÜR > Eğitim ve Öğretim > Biyoloji

Kadın Portalı Kayıt Ol İletişim Forumları Okundu Kabul Et
Alt 13-07-2013, 10:43   #1 (permalink)
 
ebush - ait Kullanıcı Resmi (Avatar)
 
Standart Hücre kültürü teknikleri nelerdir?

Hücre kültürü teknikleri nelerdir?-Hücre kültürü yöntemleri nelerdir?




İnfeksiyon hastalıklarının etkeni olan mikro-organizmaların Beslenme ve üremeleri için gerekli temel maddelere Ve çevre faktörlerine gereksinimleri vardır. Zorunlu Parazit şeklinde yaşayan viruslar üreyebilmek için mutlakaCanlı ortama gereksinim duyarlar.

Virusların etken olduğu hastalıkların erken ve doğru tanımlanması Epidemiyoloji prognoz ve halk sağlığı açısından Çok önemlidir. Bir çok virus hastalığında İnfeksiyon devam ettiği sürece etkenin izolasyonu ve Hastalığın kesin tanısı mümkündür. Fakat bu izolasyon Bakteri infeksiyonlarındaki kadar hızlı ve kolay değildir.

Virus identifikasyonu ince bir teknik yetişmiş personel ve Donanımlı bir laboratuvara gereksinim duyar ve bu zorlukları Nedeniyle bir çok ülkede referans laboratuvarları Tarafından yapılabilmektedir. Bu konuda uzmanlık öğrencilerine Eğitim verilmesi Klinik Mikrobiyoloji uzmanlık Eğitiminin önemli bir parçasıdır. Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji AD’da uzmanlık Öğrencilerine bir aylık rotasyonlarla aşağıdaki eğitim
Programı uygulanmakta ve geri bildirim alınmaktadır.

Amaç
Hücre kültürü laboratuvarında uygulanan standart yöntemler Konusunda bilgi ve beceri kazandırmak Öğrenim hedefleri
1. Hücre kültürü genel laboratuvar düzenini öğrenmek
2. Hücre üretme ortamı sıvılarını hazırlama saklama Koşulları ve sterilizasyon yöntemlerini öğrenmek
3. Hücre stok açma/stoklama yöntemlerini öğrenmek 4. Hücre dizisi oluşturma ve bunu sürdürme konusunda Bilgi ve beceri kazandırmak
5. Rutin olarak kullanılan hücre dizilerini tanıma ayırt Etme hangi etkenler için hangi hücre dizisinin kullanılması Gerektiğini öğrenmek ve uygulamak
6. Ekim öncesi örneklere uygulanan işlemleri öğrenmek Ve uygulamak
7. Hücre dizilerine örneğin inokülasyonunda kullanılan Yöntemleri öğrenmek
8. Etkenin tanımlanmasına yönelik saptama yöntemleri Konusunda bilgi ve beceri kazanmak

Teorik konular
1) Laboratuvar düzeni ve kullanılan araçlar Viroloji ve hücre kültürü laboratuvarı işlemlerin ayrı oda Ve hava akımına sahip kabinlerde (Klass 2 kabin-pozitif Basınçlı HEPA filitreli) yapıldığı şekilde oluşturulmalıdır.
Bakteri ve mantar kontaminasyonundan korunmak için Çalışma alanı çalışılmadan önce ve sonra dezenfektan Ve UV ile temizlenmeli diğer durumlarda temiz ve tozsuz Tutulmalıdır. Farklı hücre dizileri aynı anda işlenmemelidir.
Hiçbir sıvı ağız ile pipetlenmemelidir. Flasklar kullanılmadan Önce %70’lik alkol ile silinmelidir. Olası bir Kontaminasyon durumunda erken farkına varmak için
Hücre üretme besiyerleri örnek ekilmediği sürece antibiyotiksiz Kullanılmalıdır.

Mikroskoplar: Hücre kültürü laboratuvarında iki tip mikroskop Kullanılır. Flasklarda hücrelerin tek tabaka olup Olmadığı shell-vial yüzeyinde yeterli hücre olup olmadığı Ve ekimlerden sonra sitopatik etkinin izlenmesi için
“İnverted” mikroskop ve floresan antikor reaksiyonlarını İzlemek için floresan mikroskopu kullanılır.

Su banyosu: Düzenli olarak temizlenmeli ve hücrelerin Kontamine olması önlenmelidir. Azot tankından çıkarılan Hücre stoklarının hızlı eritilmesinde ve FCS’nin inaktive Edilmesinde kullanılır.

Santrifüjler: Shell-vial yönteminde tüplere hasta örnekleri Ekilmesi amacıyla kullanılır. Ayrıca bazı hasta örneklerinin Bakteri ve epitel hücrelerinden arındırılmasında da Kullanılır.

İnkübatör: Hücre kültürü ile ilgili tüm işlemlerde %5-10 CO2’li inkübatörler kullanılır. Düzenli olarak temizliğinin Yapılması kültürleri kontaminasyondan korur. 37° C ve %90-95 nemli ortam sağlanır.

Güvenlik kabinleri: Kabinlerin biri “temiz” kavramlı işler (Hücre üretme ortamlarının hazırlanması hücre pasajlanması Stok açma ve hücre stoklama işlemleri) için diğeri “kirli” kavramlı işler (hasta örneklerinin hazırlanması
hücrelere ekimi ve virus tanımlamasında) için kullanılmalıdır.
Buzdolabı ve dondurucular: Hücre üretme sıvıları

2-80C’lik soğutucularda bazı tanımlama gereçleri FCS Lglutamin
antibiyotik solüsyonları vb. –20°C’de hemen kullanılacak hücre stokları hasta örnekleri sulandırılmış monoklonal antikorlar vb –80°C’de hücre ve virus stokları ise –196°C’de (azot tankı) saklanır.

2) Hücre üretme ortamı sıvılarını hazırlama saklama koşulları ve sterilizasyon yöntemleri Hücre kültürlerinde hücrelerin üremesi ve canlılıklarının devamı için çeşitli yöntem ve çözeltiler kullanılır. Bunların ortak özellikleri vitaminler amino-asitler glikoz ve organik madeler eklenmiş tamponlu tuz çözeltileri içermeleridir.

Hücreler özel besiyeri sıvısında süspansiyon haline getirildikten sonra çeşitli yöntemlerle tüplerde üretilir.
Vücutta hücreler ve dokular devamlı olarak yıkım ürünlerini ortadan kaldırıp beslenmeyi sağlayan dolaşan vücut sıvıları ile temas halindedirler. Bu sıvılar tüm bölümler için gerekli olan canlılığı farklılaşmayı ve hücrelerin büyümesini sağlarlar. Buna benzer canlı hücreler in-vitro olarak üretildiğinde kültür sıvısı hücrelerin tüm beslenme gereksinimlerini karşılar. Virusların her birini değişik
hücre dizileri kullanarak üretmek mümkündür. Virüs izolasyonunda kullanılan hücre dizilerinin idame ve üretilme sıvıları hücrenin özelliğine göre değişiklik gösterir. Genellikle hücre dizisinin alındığı ticari kuruluşlarda hücre dizisi ile birlikte idame üretme ve stoklama sıvılarının formülleri de bulunur. Yeni hücre dizisi açıldığında pozitif kontroller ile viral izolasyon yapıp yapmadığı (endojen
virüslerle kontaminasyon) kullanılan sıvıların üremeye engel olup olmadığı (toksisite testi) sterilizasyon kontrolü (bakteri ve mantarlar için) ve Mycoplasma cinsi bakteriler ile kontaminasyonu kontrolü yapılır. Bu kontroller yıl içinde düzenli aralıklarla tekrarlanır.

3) Hücre kültürü kavramı hücre kökenleri hücre dizisini stoklama stok açma ve idame ettirme yöntemleri Hücre kültürü: Bu yöntemin temel ilkesi canlı dokulardan alınan parçaların invitro koşullarda yaşama ve üremelerinisağlamaktır. Tüp şişe gibi laboratuvar gereçlerinde uygun besleyici sıvıların içinde üretilerek kullanılan canlı dokulardır. Bu amaçla çeşitli canlıların – insan maymun tavşan kobay fare- çeşitli organları – böbrek akciğer tümör amniyon zarları vb önce parçalanarak tek tek hücrelere ayrılırlar. Bu hücreler çeşitli tuzlar tampon maddeleri amino-asitler vitaminler dana veya at serumu içeren besleyici sıvılarda süspanse ederek steril tüp veya şişelere koyulur. Bu hücre süspansüyonu 36° C’de bekletildiğinde hücreler kabın çeperine yapışarak ürerler.

Üreme sonucunda oluşan yapıya hücre kültürü denir. Çok çeşitli kaynaklardan sağlanan ve dokulardan elde edilen hücre kültürtürleri üç bölümde incelenir:


ebush isimli Üye şimdilik offline konumundadır  





Hızlı Cevap

Doğrulama Sorusu
Mesajınız:
Yazı şeklini sil
Kalın
Eğik yazı
Altı çizik

Grafik ekle
Alıntı yap [QUOTE]
 
Alanı Küçült
Alanı Büyült

Seçenekler
Stil


Hücre kültürü teknikleri nelerdir?

Hücre kültürü teknikleri nelerdir? konusu, Eğitim ve Öğretim / Biyoloji forumunda tartışılıyor.


Konu etiketleri: hücre kültürü teknikleri, hücre kültürü nedir, hücre kültürü tekniği, hücre kültürü yöntemleri, hücre kültürü tekniği nedir, hucre kulturu teknigi nedir, hücre kültür teknikleri, hücre kültürü teknigi nedir, hücre kültürü ortamları, hucre kulturu teknikleri, hücre kültürü teknigi, hucre kultur yontemlar ne larmiş, kultur teknikleri, hucre kulturu nedir bu teknik ile ne üretilir, hücre kültür teknigi nedir,

Benzer Konular

Konu Konuyu Başlatan Forum Cevap Son Mesaj
Hücre soruları ve cevapları-Hücre klasik sorular ebush Eğitim ve Öğretim 1 07-10-2015 06:01
Hücre nedir?-Hücre bölümleri nelerdir? ebush Eğitim ve Öğretim 2 17-09-2014 04:21
Hücre kültürü nedir? ebush Biyoloji 0 13-07-2013 10:33
Yön bulma teknikleri nelerdir? ebush Eğitim ve Öğretim 0 08-05-2013 03:00
Savunma Teknikleri Nelerdir? elif Eğitim ve Öğretim 0 16-06-2011 05:51

Üye olmadan soru sorabilirsiniz!

Bütün Zaman Ayarları WEZ +4 olarak düzenlenmiştir. Saat şuan 06:23 .


Powered by vBulletin® Version 3.8.7
Copyright ©2000 - 2017, Jelsoft Enterprises Ltd.
SEO by vBSEO 3.5.2 ©2010, Crawlability, Inc.
Web Stats